一種靶向肽修飾的金納米顆粒

　　肝细胞癌（简称肝癌）是世界上最常见的恶性肿瘤之一，同时也是我国最常见的 恶性肿瘤之一，中国肝癌犯病率占全球的45%，死亡率高居恶性肿瘤的第三位。肝癌起病 隐匿，早期缺少典型症状，进展快，恶性程度高，预后差，绝大部分发现时已属于中晚期。肝 细胞癌的治疗要紧以手术、化疗和放疗为主，但是化疗药物作用大多为非选择性，体内分布 广，治疗剂量下对正常组织器官毒副作用大，包括胃肠道反应、骨髓克制作用、肾毒性和药 物耐受性降低等；据统计，95%以上的肝癌患者治疗成功。 靶向肽修饰的纳米金颗粒可以显著提高其生物兼容性，增加对癌细胞的选择性， 降低毒副作用。现有技术中将多肽修饰到纳米金颗粒外表的方法有两种，一种是通过链接 剂将多肽修饰到纳米金颗粒外表，例如文献2(Langmuir，2001，17(20) :6368-74)使用聚乙 二醇（PEG)修饰纳米金颗粒后可以与多肽结合。第二种是通过形成金硫键直接将多肽修饰 在纳米金颗粒外表，例如文献3 (Bioconjugate Chemistry, 2012, 23 (7) : 1494-501)所用的 (GCGC)序列。因此，开发一种具有肝癌细胞靶向作用的纳米金颗粒作为药物载体将铂类药物运 输到肿瘤细胞内部，对肿瘤的化疗很有帮助，目前这类技术较多，但是用肝癌细胞靶向肽 SP94修饰的金纳米颗粒，至今尚未见到过报道。

本文的目的是提供一种用作为运载铂类药物的肝癌细胞靶向肽修饰的金纳米 颗粒的药物载体及其制备方法，以提高金纳米颗粒的对肝癌细胞的选择性，减小其对正常 细胞的非特异性结合并可控开释铂类药物。的确制备方案如下：

1)金纳米颗粒的制备：金纳米种子溶液的制备：称取十六烷基三甲基溴化铵CTAB溶于7. 5ml水中，在热 水中使之完全溶解，接着冷却至室温，将硼氢化钠（NaBH4)溶于冰水中，配置成10毫摩尔/ 升浓度的溶液，在CTAB溶液中进入250 μ 1的氯金酸溶液，稍微震荡，敏捷进入600 μ 1新制 备、冷冻的NaBH4，超声2分钟排除气泡，在37°C水中常温2小时以上；CTAB稳定的金纳米颗粒的制备：先称量CTAB溶于水中，热水浴使之完全溶解，然 后冷却至室温，在溶好的CTAB溶液中依次进入盐酸、硝酸银、氯金酸、抗坏血酸，摇匀为无 色后，进入种子溶液，超声2分钟排除气泡，放入37°C水浴过夜；

(2)靶向肽修饰的金纳棒的制备：取肝癌细胞靶向肽溶于水中，进入纳米金棒溶胶，缓慢升温至55°C，常温水浴3小 时后，室温下稍微搅拌2小时，用6000转/分钟，10分钟离心二次去除沉淀；

(3)带焚光基团的革巴向肽修饰的纳米金棒：取罗丹明B，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐，N-羟基丁二酰亚胺 (N-Hydroxysuccinimide，NHS)溶于水中，避光放置20分钟，进入革El向肽修饰的纳米金棒溶 液，避光搅拌反应24小时；用离心机转速6000转/分钟，离心时间10分钟多次离心去除上清液并浓缩体积。

本文所述的肝癌细胞靶向肽修饰的金纳米颗粒，有效地提高了其对肝癌细胞的选择性，提高了金纳米颗粒的生物使用度，同时本发明的制备方法简单，成本惠而不费，可以大规模制备。肽自己即具有靶向性，又具有纳米金的稳定作用，材料生物兼容性高；幸免了其它化学修饰，减少毒性。所述的肝癌细胞靶向肽修饰的金纳米颗粒运载四价铂前体药物，有效地提 高了其对肝癌细胞的选择性，提高了金纳米颗粒的生物使用度，对金纳米颗粒在肝癌的治 疗应用很有帮助，同时本发明的制备方法简单，成本惠而不费，可以大规模制备。