一種基于石墨烯量子點的電致化學發光傳感器

　　癌症是一大类恶性肿瘤的统称，它严重威逼着人类的生命健康。相伴着人们生活 平的提高，癌症的犯病率也在逐年地提高。前列腺特异抗原（Prostate Specific Antigen， PSA)是由前列腺腺泡和导管的上皮细胞分泌的一种单链糖蛋白，在功能上属于类激肽开释 酶的一种丝氨酸蛋白酶，参与精液的液化过程，是临床常规用于前列腺良性与恶性疾病诊 断与鉴别诊断及前列腺癌患者术后随访的重要指标。目前肿瘤标志物的测定方法有很多，如電化學传感器、電化學发光ECL传感器、光 电传感器等。其中电致化学发光传感器集成了電化學和化学发光两方面的优势，可对发光 强度和电流等进行同时测定。具有高灵敏度，连续可测，操作简便，易于控制，重现性和选择 性好等优点，是非常活泼的研究土地之一，在PSA检测方面具有广阔的应用前景。量子点（quantumdots，简写为Qds)，即半导体纳米晶粒，是一种新兴的发光材料， 具有特殊的发光性质和光学稳定性。与传统的電化學发光体系相比，由于量子点的電化學 发光更具可控性，同时体系也更加和气，在磁学、电学、光学、催化和化学传感以及生物医学 等方面具有广阔的应用前景。目前，基于氨基化石墨烯和羧基化石墨烯量子点用于构建检 测PSA的电致化学发光传感器尚未见报道。

本文的一个目的是提供一種基于石墨烯量子點的電致化學發光傳感器的制备 方法，所述方法制备的传感器灵敏度高、重现性好。采用的技术方案如下： a、 合成Au/Ag掺杂的氨基化石墨稀Au/Ag-rGO ; b、 制备Au/Ag掺杂的氨基化石墨烯与量子点的混合溶液； c、 制备电致化学发光传感器； 其中，步骤a合成Au/Ag掺杂的氨基化石墨稀Au/Ag-rGO的的确步骤如下： 称取一定量的氨基化石墨稀，疏散于50 mL的超纯水中，超声10 h ; (§.:依次进入一定量的硝酸银固体(与氨基化石墨烯的质量比为1:2)，5 mL I %的氯 金酸溶液，5 mg的PVP，磁力搅拌6 h; (逐滴进入4 mL 50 mmol/L的柠檬酸钠溶液，磁力搅拌过夜后，将所得的混合物在 转速9000 r下离心15 min，用超纯水洗涤、离心，最后将离心后的产物在35 ° C的真空干 燥箱中干亢，获得Au/Ag掺杂的氨基化石墨烯； 步骤b制备Au/Ag掺杂的氨基化石墨稀与量子点混合溶液的的确步骤如下： Φ氨基化石墨烯量子点与羧基化石墨烯量子点混合溶液的制备：将5 mg/mL的氨基 化石墨烯量子点和5 mg/mL的羧基化石墨烯量子点混合于离心管中（二者体积比为1:1)， 接着将EDC和NHS进入到上述溶液中（二者质量比为2:1)，4 ° C下震荡5 h，使其充分混 合获得氨基化石墨烯量子点与羧基化石墨烯量子点混合溶液； Au/Ag掺杂的氨基化石墨稀与量子点混合溶液的制备：称取一定量上述步骤a制备 的Au/Ag掺杂的氨基化石墨烯固体，进入到上述步骤b①制备的量子点混合溶液中，接着， 震荡24h，将所得的混合物在转速9000 r下离心15 min，用PBS溶液洗涤、离心，最后疏散 在pH=7. 4的PBS溶液中，使得Au/Ag掺杂的氨基化石墨烯的最后浓度为5 mg/mL ; 步骤c制备电致化学发光传感器的的确步骤如下： 将玻碳电极外表进行抛光处置使其外表光洁； Jft将所述Au/Ag掺杂的氨基化石墨烯与量子点混合物溶液滴到电极上，室温晾干； 县：将10 μ g/mL PSA抗体滴到电极外表，晾干； 再在电极外表修饰质量分数为1%的BSA溶液以排除电极的非特异性活性位点，用 超纯水对电极进行清洗，晾干； |)丨滴上一系列不同浓度的PSA抗原溶液；在4 tC保存晾干，即获得一种基于石墨烯 量子点的电致化学发光传感器。

本技术的有益成果： (1)本发明的发明人将氨基化石墨烯量子点与羧基化石墨烯量子点混合溶液引入到 PSA的电致化学发光传感器的制备居中，使用量子点混合溶液具有的特殊性质，使所制作的 传感器有更高的灵敏度。(2)本发明制备的无标记电致化学发光传感器，与庞大的夹心型传感器相比，具有 操作简便、快速的特点。(3)该传感器集成了電化學和化学发光两方面的优势，因此本发明的电致化学发 光传感器表现出了精良的准确性、稳定性、重现性与高的灵敏度，在疾病预防、疾病诊断和 药物筛选中的实际应用具有重要的意义。